本文標題:"熒光顯微鏡下觀察神經原始細胞的特點"
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熒光顯微鏡下觀察神經原始細胞的特點
大鼠神經原始細胞具有增生 (proliferation) 之特性:
在相位差顯微鏡之觀察下,培養的神經原始細胞在第二天左右,
開始複制及增生,至第四天左右,這些細胞已經形成一些小球,直到
第七天時,形成明顯的神經細胞球 (neurosphere)
將培養 7 天后的神經原始細胞,經離心 600×g 5 分鐘,將上清液
去除,重新轉種 (passage),計數細胞數目,至第四次轉種 (即第五代),
神經原始細胞具有複制及自我再生之能力
將神經原始細胞球,置于事先以 poly-L-lysine 覆蓋之培養皿上,
用 nestin 抗體以免疫細胞染色法 (immunocytochemistry) 鑑識神經原
始細胞,呈棕色的細胞即為神經原始細胞
這些具有染色的神經細胞團表現 nestin 免疫反應性,由顯示這些細胞包含神經表皮干
細胞之間質性細絲蛋白質構造,而在分化之神經細胞或膠質細胞則并
不具有此特性。
將神經原始細胞球,以綠色螢光蛋白 (GFP) 轉殖 (transfection)
入神經細胞球內,以標示細胞并觀察型態學,在濾鏡 FITC 螢光顯微
鏡下觀察可清楚地看出數十至數百顆細胞本體,以及細胞與細胞間的聯繫
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