本文標(biāo)題:"細(xì)胞計(jì)數(shù)-緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響"
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細(xì)胞計(jì)數(shù)-緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響
網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 用注射器吸取骨髓液滴予煌焦油藍(lán)色膜上,
用玻片覆蓋;或?qū)⑼科V撬枰嘿N于煌焦油藍(lán)色膜上,上下翻
動(dòng),直至標(biāo)本與色膜完全溶合混勻?yàn)橹埂?0-30 min后,揭開玻片
,用性性質(zhì)。細(xì)胞核染色質(zhì)的核酸與強(qiáng)堿性的組蛋白、精蛋白等形
成核蛋白,這種強(qiáng)堿性物質(zhì)與賴特染料中的酸性染料伊紅有親和力
,故染成紅色;但核蛋白中還有少量的弱酸性蛋白及其氨基,又與
賴特染料中的美藍(lán)起作用,只因其量太少,而不顯藍(lán)色,故細(xì)胞核
呈紫紅色。較幼稚細(xì)胞之胞漿和細(xì)胞核之核仁含有酸性物質(zhì),與賴
特染液中的堿性染料美藍(lán)有親和力,故染成藍(lán)色;當(dāng)酸堿物質(zhì)各半
時(shí),則染成紅藍(lán)色或灰紅色,即所謂多嗜性。
緩沖液細(xì)胞染色深受酸堿度(pH)的影響。由于各細(xì)胞成分蛋
白質(zhì)的等電點(diǎn)不同,染色親和力也大不相同,蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)之上
時(shí),可和陽(yáng)離子(如堿性染料美藍(lán)等)相結(jié)合;而在等電點(diǎn)之下時(shí),
則和陰離子(如酸性染料伊紅等)相結(jié)合。當(dāng)染色時(shí),若染色液偏堿
性,則細(xì)胞著色偏藍(lán);反之,染色液偏酸性時(shí),則細(xì)胞著色較紅。
為使細(xì)胞染色良好,必須使染色液在一定的pH范圍內(nèi)染色,通常賴
特染液pH值以6.4.6.8為最佳。
沖洗:用自來(lái)水沖洗涂片上之染液。要輕輕搖動(dòng)涂片,使染液
沉渣浮起沖走,切勿先傾去染液再用水沖;否則,涂片上的許多染
料將沉淀于涂膜上。沖洗時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng),水沖力亦不可太大,以防
脫色或涂膜脫落。沖洗后之標(biāo)本豎置在片架上,于空氣中自然干燥
,或用潔凈吸水紙將水吸于。
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