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本文標題:"顯微鏡計數前需要用濾膜將一定體積的細胞濃縮"

發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間:2016-10-31 16:41:24

顯微鏡計數前需要用濾膜將一定體積的細胞濃縮

 
    當需計數的樣品幾乎不含細胞或者細胞濃度非常低時(如灌裝
流水線上的葡萄酒),在顯微鏡計數前需要用濾膜(<0.45μm)將一
定體積的細胞濃縮。
    1.用9mL稀釋空白液和樣品充分混勻,準備合適梯度的待測樣
品。
    2.將血球計數板上的蓋片蓋在計數槽上。
    3.如果計數前需要進行細胞染色,必須將樣品和染色液混合
均勻。記錄體積和特定的稀釋參數。
    4.使用移液管將稀釋或未稀釋的樣品滴1滴于血球計數板上每
個待測表面的輸液槽(V形凹槽)內,通過毛細管滲透作用,蓋片下
的樣品溶液將均勻滲透入計數區域中。或者,將最終稀釋液直接滴
1滴于計數方格中,之后蓋上蓋片。盡管這種方法也可行,但蓋蓋
片時要非常小心,避免在計數區域內出現氣泡。另外,溶液未充滿
計數方格或者溢出計數槽都是不行的。
    5.使用顯微鏡時,可以選擇40×或100×的物鏡放大倍數,統
計足夠量的方格中的細胞數,使細胞總數約600個。分別統計血球
計數板上的2個計數區域的細胞數,再相加取平均值。
    6.計算公式:原始樣品菌數(細胞個數/mL)=計數區域內的平
均細胞數×用于計數的溶液體積×稀釋倍數
 

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