本文標(biāo)題："標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)法計數(shù)微生物是最廣泛應(yīng)用的一種方法"
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標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)法計數(shù)微生物是最廣泛應(yīng)用的一種方法
從環(huán)境試樣中分離微生物的過程常常需要進一步分離從涂布或傾注平板法中
發(fā)現(xiàn)的單個菌落，對其鑒定或確認。在這個方法中，常用無菌接種環(huán)把菌落從原
始培養(yǎng)平板中挑取并劃線稀釋到新的瓊脂培養(yǎng)皿中
標(biāo)準(zhǔn)平板計數(shù)法計數(shù)微生物是微生物學(xué)中最古老、最廣泛應(yīng)用的一種方法。
盡管廣泛應(yīng)用，這種稀釋平板技術(shù)自從它的使用之初就受到懷疑和批評。主要批
評的一點是:像顯微觀察那祥，整個群體中僅有很少部分能在實驗室培養(yǎng)基中培
養(yǎng)。大量文獻說明，直接顯微計數(shù)的細胞數(shù)中只有1%一10%的細胞能用平板計
數(shù)技術(shù)復(fù)活成可活的細菌。各種方法之間存在的巨大差異可能是多
方面的因素產(chǎn)生的。首先，低底物水平的環(huán)境試樣中含有一些營養(yǎng)饑餓或寡營養(yǎng)
生物，它們生長得很慢或根本就不可培養(yǎng)，所以不能在規(guī)定時間內(nèi)形成菌落;其
次，由于提取和稀釋過程中施加的壓迫導(dǎo)致活的微生物變得不可培養(yǎng);再一個原
因就是菌落形成過程中細菌間的競爭抑制了某些微生物的生長;另外，所有微生
物都在營養(yǎng)物和電子受體需求方面有不同的最適宜及最低的生長條件。因此，某
些微生物在培養(yǎng)基中長得很慢或根本不生長。因為大多數(shù)自然環(huán)境都是寡營養(yǎng)
的，因而平板培養(yǎng)基的營養(yǎng)狀況是進行活細胞計數(shù)所考慮的重點。許多土壤分離
菌在貧營養(yǎng)培養(yǎng)基中比富營養(yǎng)培養(yǎng)基中生長、繁殖得更好。最后，活細菌的回收
(指使一個細胞形成一個菌落)所產(chǎn)生的偏差是由于提取步驟中細菌從土壤顆粒
中的不完全釋放或稀釋過程中細菌的不完全分離。這使得菌團長成了單個菌落，
從而導(dǎo)致出現(xiàn)的菌落數(shù)偏低。很難確定這些因素中是哪一種導(dǎo)致直接計數(shù)與活細
胞計數(shù)間存在的1-2個數(shù)量級的差異。
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