本文標(biāo)題:"聚合酶鏈鎖反應(yīng)的流程-金相顯微鏡門市"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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聚合酶鏈鎖反應(yīng)(PCR)
聚合酶鏈鎖反應(yīng)(PCR:Polymerase Chain Reaction)
直接在反應(yīng)器中大量復(fù)制一段特定的「目標(biāo)DNA」,也就是大量復(fù)制某一段DNA,由于直接在反應(yīng)器中進(jìn)行,可以快速?gòu)?fù)制大量的DNA片段,只需要比較短的時(shí)間。
聚合酶鏈鎖反應(yīng)的流程
>添加反應(yīng)物:直接將要復(fù)制的雙股「目標(biāo)DNA」置于反應(yīng)器內(nèi),另外加入聚合酶(Polymerase)、引子對(duì)(Primer)與核苷酸(A、T、 G、C)。
>升溫變性(Denaturation):將反應(yīng)器加熱至95?C,打斷雙股DNA之間的氫鍵,如**圖16-15(a)所示。
>降溫黏合(Annealing):將反應(yīng)器降溫至60?C,聚合酶作用使引子對(duì)(較小段的DNA)與目標(biāo)DNA產(chǎn)生配對(duì),如圖16-15(b)所示。
>引子擴(kuò)張(Primer extension):聚合酶作用使核苷酸(A、T、G、C)一個(gè)個(gè)與引子對(duì)連接,引子對(duì)擴(kuò)張時(shí)以目標(biāo)DNA的雙股為模版產(chǎn)生配對(duì),如圖16- 15(c)所示。
>重覆反應(yīng):重覆上述三個(gè)反應(yīng)30次以上,可以產(chǎn)生230個(gè)(大約10億個(gè))以上的目標(biāo)DNA,如圖16-15(d)所示。
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