本文標題:"茶葉農藥殘留量計算實驗方法步驟!生命科學!"
研究步驟:
(1) 取茶葉10g置入茶具(另取茶葉10g做空白對照組用)
(2) 加入有機氯農藥Cl-1組(5μg/mL)1mL。
(3) 沖入沸水后馬上倒出第1泡茶水,之后再加入沸水靜置2分鐘倒出第2泡茶水,(以此類推如第三泡,第四泡,第五泡…)(空白對照組只取第一泡茶水)
(4) 過濾茶水
(5) 并紀錄體積V1
No.1茶水 235mL、No.2茶水 192.5mL
No.3茶水 195mL、No.4茶水 210mL
No.5茶水 192.5mL、空白茶水 192.5 mL
(6) 各取100 mL,加入200 mL氰甲烷(CH3CN),搖晃混合。
*搖晃前,量筒內的溶液大約分成上下兩層,下層顏色較深,因為茶水的比重>氰甲烷(1:0.777),搖晃后,量筒內的溶液均勻混合。
(7) V2體積紀錄(加入200 mL氰甲烷及茶水100mL后的混合體積)
No.1茶水 295mL、No.2茶水 295mL
No.3茶水 297.5mL、No.4茶水 295mL
No.5茶水 297.5mL、空白茶水 297.5mL
p.s.有縮合的現象,所以體積會減少2.5~5 mL
(8) 再各取混合溶液100 mL,加入氯化鈉(NaCl) 15g搖晃,靜置15分鐘。
*因NaCl與CH3CN不互溶,所以將NaCl加入此混合溶液中,過多的NaCl(15g)使水達到飽和狀態,無法再溶解CH3CN,故會上下分層。
(9) Va體積紀錄(加入NaCl 15g搖晃且靜置15分鐘后)
(全部液體)
No.1茶水 107mL、No.2茶水 107mL
No.3茶水 108mL、No.4茶水 106mL
No.5茶水 108mL、空白茶水 108mL
(10) Vb體積紀錄(下層液體)
No.1茶水 31mL、No.2茶水 31mL
No.3茶水 31mL、No.4茶水 31mL
No.5茶水 32mL、空白茶水 31mL
*V3體積(上層液體)=Va-Vb
No.1茶水 76mL、No.2茶水 76mL
No.3茶水 77mL、No.4茶水 75mL
No.5茶水 76mL、空白茶水 77mL
(11) 取上層液10 mL,置于試管內,用氮氣(N2)吹乾。
(12) 吹乾后,加入2 mL正己烷(n-C6H14)溶解試管中的殘留
物(可能含有茶葉中的色素雜質及農藥),攪拌。
(13) 先加正己烷潤濕固相萃取匣。
*其目的在于保濕以及不讓上次實驗殘留物影響
(14) 再移入步驟12.的正己烷溶解液(讓殘留物留在固相萃取匣)
(15) 加入沖提溶液(10%丙酮/正己烷)5mL 沖提2次。
*將農藥沖提出,色素雜質留在萃取匣中
(16) 收集沖提液,N2吹乾,然后加入1mL正己烷,攪拌。
(17) 移入GC自動樣品瓶。
(5支分析樣品、1支空白對照、1支有機氯農藥標準對照)
1
(18) 注入氣相層析儀/電子捕捉檢出器(GC/ECD)分析有機氯農藥之含量。
3.氣相層析儀分析條件
(1)層析管: J&W DB-608 , 30 m X 0.53 mm X 0.83 um
(2)烘箱溫度:起始溫度為210℃,維持25min,以6℃/min速度升溫至270℃,維持20min,再回溫至50℃。
(3)注射口溫度: 250℃
(4)檢出器溫度: 300℃
(5)載流氣體:氮氣(N2),純度99.995﹪
(6)載流氣體(carrier gas) N2 流速: 6.0 ml/min
(7)輔助氣體 N2 流速:25 ml/min
(8)檢出器 : 電子捕捉器(ECD)
4.農藥殘留量計算
依GC層析圖得到標準校正曲線,求出檢體中農藥殘留量:
農藥殘留量(ppm) = C×1mL×V2×V1
V3×V1×100 mL×W
C:由各農藥校正曲線求得之濃度(μg/mL)
V1:抽氣過濾,過濾茶水體積(約200mL)
V2:加入200 mL氰甲烷及茶水100mL后的混合體積(約300mL)
V3:加入NaCl 15g搖晃且靜置15分鐘后,上層液體體積
W:茶葉重量(10g)
5.回收率
回收率=(實驗值/理論值)×100﹪
實驗值:實驗分析結果值
理論值:添加農藥標準劑于茶葉之含量值
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